大傢好，我是一隻辣梨！一個一戰上岸985的二本醫學檢驗畢業生。
今天要分享的是如何快速復習完弧桿、螺桿、非發酵菌。
話不多說！開整！
首先，對這三個章節進行重點勾畫：
- 弧桿菌：包括霍亂弧菌的致病機制、微生物學檢驗；副溶血弧菌的總結、神奈川現象。
- 螺桿菌：彎曲菌中的溫度試驗、螺桿菌的共同特征、幽門的致病機制、細菌鑒定和常見檢測試驗。
- 非發酵：非發酵定義；綠膿菌的鑒定和其它非發酵菌。
一、弧桿菌
弧桿菌是一群直或彎曲的革蘭陰性細菌，一端有鞭毛、運動迅速。兼性厭氧、有嚴格的營養要求，發酵葡萄糖、氧化酶試驗陽性。細菌常見於淡水，海水中，偶見於魚或者是人體標本中。常考的弧菌有：霍亂弧菌，副溶血弧菌。
（一）霍亂弧菌1、分類：O1群霍亂弧菌（古典型+ EI-Tor型)+0139、非01型2、致病：
（1）致病物質：霍亂毒素CT=A1+A3+BA1 :結合Gs蛋白–過度分泌離子+水; A2:助菌入胞； B：結合苷脂受體—-細菌脫水、 離子（2）機制：胃酸降低、細菌增加+鞭毛運動，穿腸壁+菌毛黏附黏腸壁（3）疾病：米泔水樣便、不吃也拉（上吐下瀉）、糞便中WBC、RBC都很少
3、微生物檢驗：
（1)檢測程序：標本采集和處理→→直接檢查→→分離鑒定→→基本生化、血清學（初步確定、申請復核）→→全面生化、血清學分群。
在不同書上檢測順序不同，但其實沒有多大關系，記得有初步報告和復核就可以瞭。
（2）檢測內容：
①標本采集：采集患者“米泔水”水樣糞便，；
②直接檢查：直接熒光抗體染色和抗 o1群抗原等單克隆抗體凝集試驗，可快速診斷，霍亂弧菌感染霍亂毒素測定，采用乳膠凝集實驗
③分離鑒定：堿性蛋白腖水增菌→→接種TCBS（黃色）、4號瓊脂平板（中心灰黑色）→→多價/單價血清凝集試驗（陽性）
④若上述試驗初步診斷為霍亂弧菌感染，則需立即報告疫情部門，
⑥挑選可疑菌落純培養，進行鑒定，塗片染色鏡檢、懸滴法觀察動力，進行動力制動試驗，全面生化反應，血清凝集試驗進行分群和分型，明確診斷，（賴氨酸脫羧酶+、鳥氨酸脫羧酶+和精氨酸水解酶-）
⑦K-B 藥敏試驗；
⑧報告。
PS:
① 塗片鏡檢：是指塗片 2張，甲醛？或乙醇固定，分別用格蘭染色或 1:10稀釋的苯酚復紅染色，油 鏡下觀察呈魚群狀排列的桿狀/弧形革蘭陰性桿狀菌。
② 血清學凝集試驗：在使用 O1群和 O129群弧菌多價和單價血清進行凝集。
（3）其它鑒定試驗：
① 霍亂紅試驗：霍亂弧菌有色氨酸酶和硝酸鹽還原能力。當將霍亂弧菌培養於含硝酸鹽的蛋白腖水中時，可分解培養基中的色氨酸產生吲哚。同時,還原硝酸鹽成為亞硝酸鹽，兩種產物結合成亞硝酸吲哚。滴加濃硫酸後呈現薔薇色,是為霍亂紅試驗陽性。非特異反應。
② 黏絲試驗:將 0.5%去氧膽酸鈉水溶液與霍亂弧菌混勻。1分鐘內懸液由混變清，並變黏稠，以接種環挑取時有黏絲形成。非特異反應。
③ 0/129敏感試驗；
④ 耐鹽培養試驗:在不含氯化鈉和含 3%氯化鈉培養基中生長，濃度高於 6%不生長。
⑤ 雞紅細胞凝集試驗、多黏菌素 B敏感試驗和第 IV、V組噬菌體裂解試驗等用於區別古典和 EI-Tor生物型。
（二）副溶血弧菌：
（1）有嗜鹽性、引起食物中毒、急性腹瀉；沿海地區和海島食物中毒最常見病原菌。
（2）神奈川現象（KP）：在普通血平板（含羊、兔、馬等血液）上不溶血或隻產生α溶血。但 在特定條件下，某些菌株在含高鹽（7%）的人 O型血或兔血以及 D-甘露醇作為碳源的我萋瓊脂平板上可產生β溶血，稱為神奈川現象。
（3）NaCl生長試驗:該菌在不含 NaCl和含 10%NaCl的蛋白腖水中不生長，在含 3% 和 6%NaCl蛋白腖水中生長。
二、螺桿菌 ：微需氧5%O2、85%N2、10%CO2
（一）彎曲菌：空腸彎曲菌在 42℃生長，25℃不生長。胎兒彎曲菌在 25℃生長，42℃不生長。37℃最適宜。
（二）螺桿菌：主要是幽門螺旋桿菌（HP）
1、共同特征：
螺桿菌為革蘭陰性、螺旋形、彎曲呈逗點狀、S形或海鷗展翅形、無芽胞桿菌，菌體大小為（0.2～1.2）μm ×（1.5～10.0）μm。在陳舊培養物中可呈橢圓體或球菌體。 可自主運動，通常有多根單極鞘內鞭毛。大部分定居於哺乳動物的胃或腸道。 幽門螺桿菌在胃黏膜黏液層中常呈魚群樣排列。 生化反應不活潑（+鑒定的內容）
2、致病機制：
①特殊的螺旋狀形態和端鞭毛，穿過黏液層與胃黏膜細胞接觸;
②高活性胞外脲酶分解尿素，產氨中和菌周胃酸,形成堿性微環境，利於細菌定植:
③空胞毒素(VacA)誘導細胞發生空泡變性,潰瘍形成;
④其產生的細胞毒素相關基因 A蛋白 CagA蛋白的存在與胃癌的發生密切相關。
3、細菌鑒定：革蘭陰性，菌體細長彎曲呈螺旋形、S形或海鷗狀。有鞭毛、運動活潑。濕潤條件下培養3天左右，可見針尖樣、圓形半透明菌落。生化反應不活潑。氧化酶、觸酶、DNA酶均陽性。快速脲酶試驗強陽性。
4、常見試驗：
（1）快速脲酶試驗：是用於 Hp快速診斷的一種簡便實用、快速敏感、準確可靠的方法。脲酶試劑由尿素、基質（瓊脂或緩沖液）、酚紅指示劑等組成。將小塊的活組織塊放入裝有 Christensen尿素 培養基的瓶內，如培養基由黃變紅為陽性，提示該菌產生的高活性脈酶已將尿素分解。
（2）碳標記尿素呼吸試驗：基本方法是患者禁食一夜，進食用 13C或 14C標記的尿素，Hp產生的尿 素酶分解尿素釋放 CO2,因此，可測定患者呼吸中釋放帶有同位素的 CO,量，如 CO2含量超過標準， 提示有 Hp存在。無創性方法。
三、非發酵菌
（一）定義：是一大群需氧或兼性厭氧、無芽胞、不發酵葡萄糖或僅以氧化形式利用葡萄糖的無芽胞革蘭陰性桿菌的統稱。廣泛存在於人體體表、開放體腔以及醫院相關的外環境中，多為條件致病菌。除不動桿菌屬和嗜麥芽窄食單胞菌等少數菌種外，其他菌種氧化酶均為陽性。 常見非發酵菌:銅綠假單胞菌、鮑曼不動桿菌和嗜麥芽窄食單胞菌。
（二）銅綠假單胞菌=綠膿菌；
（1）簡述：G-桿菌、無芽胞、無莢膜，有鞭毛，專性需氧菌，最適溫度為 30～37℃，能在普通瓊脂上生長，產生水溶性色素和胞外酶。常見於下呼吸道感染、呼吸機使用者、燒傷、長期臥床。
（2）鑒定：
①染色形態：G-，細長桿菌，兩端鈍圓，單個或成雙排列。
②培養特性：4℃不生長，42℃生長；血平板：有金屬光澤、生薑氣味的灰綠色或藍綠色菌落，菌落周圍有β溶血環。（可形成綠膿素、熒光素、紅膿素和黑膿素）
③生化反應：氧化酶陽性，能氧化分解葡萄糖，產酸不產氣。 利用枸櫞酸鹽，不產生吲哚，不產生 H2S，能液化明膠，分解尿素，還原硝酸鹽並產生 N2。
（三）其它非發酵菌：
①不動桿菌 鮑曼：“三陰”，氧化酶陰性，硝酸鹽還原試驗陰性和動力陰性。
②窄食單胞菌 嗜麥芽 ：血瓊脂平板上，35"C培養 48小時菌落可呈黃色、綠色或灰 白色,菌落中心可有變透明的趨勢,稱為“貓眼”現象。氧化酶陰性，DNA酶陽性並可使賴氨酸脫羧，氧化分解麥芽糖。
③洋蔥伯克霍爾德菌：肺組織的慢性纖維化病變; 鼻疽伯克霍爾德茵和類鼻疽伯克霍爾德菌，形成車輪樣菌落，有強烈土腥味
④熒光假單胞菌：污染血液並引起輸血後的血流感染;（4℃生長，42℃不生長）
上期看點：
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最後，祝備考的胖友們，效率翻倍、成績加倍。
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